微生物實(shí)驗(yàn)室時(shí)進(jìn)行核酸檢測(cè)時(shí)需要有嚴(yán)格的規(guī)范流程進(jìn)行操作，做實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)要注意不要影響實(shí)驗(yàn)室試劑的使用，在進(jìn)行核酸檢測(cè)時(shí)，流程相對(duì)比較復(fù)雜，但是每一個(gè)過(guò)程都需要嚴(yán)格地進(jìn)行。這一點(diǎn)是樣品處理時(shí)要注意操作的時(shí)間和試劑含量，這些都需要規(guī)范操作。那么具體的步驟有哪些呢?讓我們來(lái)一起了解一下吧。

　　用1.5ml的無(wú)菌EP管，移液器移取560μl AVL裂解液，加入5.6μl Carrier RNA，加入140μl的已滅活的待提取核酸的待測(cè)樣本，渦旋振蕩15s，室溫靜止10min。將上述EP管放入離心機(jī)內(nèi)瞬時(shí)離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產(chǎn)物，防止污染。裂解完成后，加入560μl無(wú)水乙醇，振蕩混勻15s，將上述EP管放入離心機(jī)內(nèi)瞬時(shí)離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產(chǎn)物，防止污染。

　　微生物實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)向離心柱加入裂解產(chǎn)物630μl，8000轉(zhuǎn)離心1min，若離心機(jī)在生物安全柜之外，每次使用都需進(jìn)行外表面消毒。更換新廢液收集管，要從離心機(jī)中小心取出離心柱，將上層離心柱轉(zhuǎn)移到新收集管中，繼續(xù)將剩余裂解產(chǎn)物630μl加入離心柱中，若樣本體積大于140μl時(shí)需重復(fù)此步驟，直到全部裂解產(chǎn)物都過(guò)柱離心，8000轉(zhuǎn)離心1min，小心將離心柱轉(zhuǎn)移到新的收集管中。

　　取500μl AW1加入離心柱中(注意，此處加樣操作時(shí)務(wù)必將移液器吸頭接觸離心柱內(nèi)壁緩慢加樣)，8000轉(zhuǎn)離心1min。小心取出離心柱，更換新的收集管。

　　取500μl AW2加入離心柱中，14000轉(zhuǎn)離心3min，小心取出離心柱，更換新的離心柱上端收集管，置于離心機(jī)中使用較大轉(zhuǎn)速離心1min，以確保將AW2中的殘液完全離心干凈。

　　然后，取無(wú)菌1.5mlEP管收集核酸，將離心柱上端小心放入1.5mlEP管中，取40-60μl的洗脫液AVE加入到離心柱中(注意：洗脫液應(yīng)盡量全部覆蓋住離心柱膜)，用EP管管蓋蓋住離心柱，使用無(wú)菌剪刀剪去原離心柱管蓋。

　　操作完成后將在室溫溫度下靜止1min，將其放入離心機(jī)中8000轉(zhuǎn)離心1min，回收核酸。丟棄離心柱，EP管中即為獲取的提取核酸，做好標(biāo)記與登記。

　　以上就是微生物實(shí)驗(yàn)室在檢測(cè)樣本時(shí)裂解的步驟具體描述，從上面的描述可以看出這一過(guò)程的嚴(yán)格和規(guī)范，在試樣裂解過(guò)程中要注意時(shí)間的控制。避免在一個(gè)步驟中出現(xiàn)導(dǎo)致樣品損壞。